1.不去看說(shuō)明書,直接就上機(jī)使用
色譜柱內(nèi)部保存著什么溶劑一定要看清楚,因此色譜柱的說(shuō)明書一定要看清楚,當(dāng)然也包括說(shuō)明書上建議的維護(hù)保養(yǎng)規(guī)定,對(duì)我們都非常的有用。對(duì)于反相柱來(lái)說(shuō),溶劑基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了,因?yàn)檎嘀丝梢赃m用正相系統(tǒng),也可以適用反相系統(tǒng),因此一定要看清楚,對(duì)于你的方法來(lái)說(shuō)是否需要置換色譜柱內(nèi)部保存溶劑。
2.色譜柱的流向不能改變
在我們常規(guī)思維中,色譜柱上標(biāo)示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循??墒?,大家有沒(méi)有想過(guò)這個(gè)方向的作用是什么呢?為什么要標(biāo)示一個(gè)使用方向呢?
其實(shí)色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標(biāo)示方向的目的就是讓我們?cè)谑褂弥杏涀×鲃?dòng)相從哪個(gè)方向流入色譜柱,那么這個(gè)流入段就是zui先污染端。這樣就為我們?nèi)蘸缶S護(hù)或再生色譜柱做了準(zhǔn)備,而我們需要遵循這個(gè)規(guī)定應(yīng)該在色譜柱開始做樣后。
我曾將已經(jīng)污染過(guò)的色譜柱反方向來(lái)使用,如果保留時(shí)間不是很長(zhǎng),而色譜柱足夠長(zhǎng),還是能使用一段時(shí)間的。
關(guān)于沖洗:
3.用純水沖洗色譜柱才能把緩沖液沖洗干凈
使用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱對(duì)內(nèi)部填料的損傷是zui大的,尤其是純水,除非你的色譜柱是耐水的。沖洗色譜柱的方法是用流動(dòng)相比例的水系和有機(jī)系來(lái)沖洗。如果你認(rèn)為流動(dòng)相比例無(wú)法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機(jī)系占有比例過(guò)大,你可以使用內(nèi)含10%左右的純水來(lái)沖洗。
關(guān)于再生:
4.色譜柱污染后把篩板卸下來(lái)超聲清洗
對(duì)于色譜柱的污染,*的就是篩板,因此我們zui常用的做法就是把柱頭卸下來(lái),把篩板拿去超聲清洗。但是我們?cè)诓鹦哆^(guò)程中對(duì)色譜柱前端填料的損害遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于污染照成的傷害,因?yàn)槲覀儾皇菍I(yè)的。因此建議這一步能不做就不做。
5.用異丙醇沖洗再生后,柱子效果更差了
這種情況我自己就遇到過(guò),還好那根柱子本來(lái)就打算報(bào)廢了,因此也沒(méi)有照成多少損失。但是這是什么原因呢?其實(shí)很簡(jiǎn)單,就是在我反向沖洗前沒(méi)有把管路中的污染物沖洗干凈就直接接了柱子。所以說(shuō),方法是沒(méi)有錯(cuò)的,色譜柱受污染時(shí),我們應(yīng)該先想到儀器也污染了!
關(guān)于保存:
6.保存在乙腈或甲醇中的新色譜柱可以直接使用
理論上液相色譜柱不同于氣相色譜柱需要活化,但是由于液相色譜柱內(nèi)部保存的有機(jī)系具有揮發(fā)性,因此在使用前還是應(yīng)該用小流速的和色譜柱內(nèi)部相同的溶劑沖洗一定的時(shí)間。可以是0.5ml/min,120min,但咨詢廠家,根據(jù)色譜柱參數(shù)設(shè)定。
7.色譜柱應(yīng)該保存在純乙腈或甲醇中
色譜柱內(nèi)部保存液具有揮發(fā)性,因此為了減少其揮發(fā)速度,可以添加5%-10%的水,這樣的話可以在一定程度上減少一些有機(jī)系的揮發(fā)。如果再增加一個(gè)保險(xiǎn),我們可以在堵緊堵頭后,再用封口膜封起來(lái)。同樣道理,色譜柱一段時(shí)間不用后,也應(yīng)該按照第4條,進(jìn)行小流速的沖洗色譜柱。
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